Tạo dòng, biểu hiện kháng nguyên F18 dung hợp peptide định hướng tế bào M

Tiêm mao F18 đóng vai trò quan trọng giúp Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) bám vào ruột và tiết độc tố gây bệnh tiêu chảy heo con sau cai sữa (post-weaning diarrhea, PWD). Vaccine là một cách thức hữu hiệu, kinh tế khả thi phòng chống ETEC trên heo. Việc phát triển vaccine uống, tạo miễn dịch niêm mạc thông qua nhắm trúng đích bào M đang được tâm. Nhiều nghiên cứu cho thấy Hsp60 có năng tương tác với PrPC bề mặt M. Dựa cấu trúc của tin sinh học, peptide PEP dự đoán thụ thể PrPC. Vector pET22b-pep-f18 bằng thế gene gfp trong vector pET22b‑pep‑gfp f18. Sau khi xử lí cặp enzyme cắt hạn chế XhoI BamHI, f18 nối nhau T4 DNA Ligase. pET22b‑pep-f18 hóa biến nạp chủng vi khuẩn E. BL21(DE3), cảm ứng biểu hiện IPTG 0,5 mM. Sự protein PEP‑GFP kiểm tra điện di SDS-PAGE, nhuộm Coomassie Blue Western blot kháng 6xHis. Cuối cùng, PEP‑F18 tinh sạch sắc ký ái lực ion kim loại (IMAC). Kết quả đã thành công. Protein thu nhận, độ cao...